口腔医学研究 ›› 2018, Vol. 34 ›› Issue (7): 712-716.DOI: 10.13701/j.cnki.kqyxyj.2018.07.007
王莹1,2, 徐燕1*, 庞罡1, 叶兴如1, 何家林1,2, 谢贤哲1,2
WANG Ying1,2, XU Yan1*, PANG Gang1, YE Xing-ru1, HE Jia-ling1,2, XIE Xian-zhe1,2
摘要: 目的:在无血清培养条件下,使用富血小板纤维蛋白提取液(platelet-rich fibrin extract,PRFe)对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)增殖及分化的影响。方法:从健康志愿者的阻生齿中分离培养hDPSCs,经细胞形态和流式细胞技术对其鉴定。实验组中使用含PRFe不含胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)的α-最低必须培养基(α-minimal essential medium,α-MEM),对照组中使用含10%FBS的α-MEM。噻唑蓝(methyl thiazol tetrazolium,MTT)法检测培养1~7 d的细胞增殖情况。成骨能力的测定采用碱性磷酸酶染色,实时荧光定量聚合酶链式反应(real time quantitive-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)、骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)和runt相关转录因子2(runt-related transcription factor-2,RUNX-2)的表达。结果: hDPSCs高表达CD44、CD90和CD105,低表达CD34和CD45。两种培养基培养细胞形态相似,实验组的细胞形态更为纤长。随着诱导时间的增加,两组的成骨分化能力均上调(P<0.05),实验组成骨分化能力强于对照组(P<0.05)。结论: 适宜浓度PRFe能够维持hDPSCs增殖分化。