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G9a在斑马鱼咽齿形态发生过程中的时空表达模式研究
祖帅, 吴云海, 彭佳, 杨菲, 刘洋, 胡红梅, 李伟
2026, 42(10):
853-859.
DOI: 10.13701/j.cnki.kqyxyj.2026.10.005
摘要
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目的: 本研究旨在探究组蛋白H3K9甲基转移酶G9a在斑马鱼咽齿从发生到早期形态建成关键阶段的时空表达模式。方法: 以野生型AB系斑马鱼为模型,收集36~84 hpf的胚胎。通过逆转录-聚合酶链反应(reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-PCR)克隆斑马鱼咽齿特异性标记基因配对样同源域2(paired-like homeodomain 2,pitx2)、远端缺失同源盒基因2b(distal-less homeobox 2b,dlx2b)及G9a基因编码区片段,制备地高辛标记的反义RNA探针。采用整体原位杂交(whole-mount in situ hybridization,WISH)技术系统检测G9a在咽齿发育区域的动态表达,并与pitx2和dlx2b的表达模式进行共定位比较。结果: RT-PCR成功克隆得到目的基因片段。原位杂交结果显示,在36~48 hpf,G9a在咽部区域呈现广泛表达。至56~60 hpf,咽齿牙胚开始特化,pitx2与dlx2b在特定区域呈现强阳性信号,此时G9a的表达区域与pitx2、dlx2b的表达区域高度重叠。在72~84 hpf的形态发生阶段,G9a在持续发育的咽齿原基中保持显著表达。结论: 本研究揭示了G9a在斑马鱼咽齿发育关键时期具有特定的时空表达模式,其表达区域与已知的咽齿标记基因高度一致,提示G9a可能通过表观遗传调控机制参与斑马鱼咽齿的形态发生过程。
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